دانلود پایان نامه و مقاله کارشناسی ارشد
دانلود پایان نامه و مقاله کارشناسی ارشد- متن کامل - همه رشته هادانلود پایان نامه و مقاله کارشناسی ارشد
دانلود پایان نامه و مقاله کارشناسی ارشد- متن کامل - همه رشته هاپایان نامه ساخت و ارزیابی کاتالیزور وانادیل پیرو فسفات حاوی کبالت (Co-VPO)و کاربرد آن در اکسیداسیون...
2-10- محیط کلسینه و تاثیر آن بر خصوصیات فیزیکوشیمیایی وانادیل پیرو فسفات در اکسیداسیون انتخابی n- بوتان و پروپان. 50
فصل سوم – مراحل تجربی
3-1- معرفی مواد شیمیایی. 52
3-1- معرفی مواد شیمیایی. 53
3-2- تهیه کاتالیزور VPO و کاتالیزور های VPO حاوی کبالت ((Co/VPO.. 53
3-2-1- تهیه کاتالیزور (VO)2P2O7 53
3-2-1-1- تهیه پیش کاتالیزور (VOHPO4-0.5H2O) 54
عنوان صفحه
3-2-1-2- کلسینه کردن ((Dehydration پیش کاتالیزور (VOHPO4-0.5H2O) 54
3-2-2- تهیه کاتالیزور های Co/VPO.. 55
3-3- تعیین کاراکتر و خصوصیات ساختاری کاتالیزور. 57
3-4- تست رآکتوری و انجام واکنش اکسیداسیون الکل. 57
3-5- آنالیز محصولات و شرایط آن. 58
این مطلب را هم بخوانید :
3-5-1- ضرایب تصحیح. 59
3-6- اکسیداسیون بنزیل الکل تحت کاتالیزور های VPO و Co/VPO.. 61
3-6-1- بررسی اثر نوع الکل در اکسایش ها توسط کاتالیزور (3%) Co/VPO (I) 61
3-6-2- بررسی اثر نوع حلال در اکسایش بنزیل الکل توسط کاتالیزور (3%)Co/VPO (I) 62
3-6-3- بررسی اثر مقدار کاتالیزور Co/VPO (I) (3%) در اکسایش بنزیل الکل. 62
3-6-4- بررسی اثر تغییر نسبت اکسید کننده به ماده ی اولیه در اکسایش بنزیل الکل در حضور کاتالیزور (3%) Co/VPO (I) 62
3-6-5- بررسی اثر خیساندن و قابلیت کاربرد مجدد کاتالیزور (3%) Co/VPO (I) 63
3-6-6- بررسی دما در اکسایش بنزیل الکل در حضور کاتالیزور 3%) Co/VPO (I) 63
فصل چهارم – نتایج و بحث
4-1- تعیین کاراکتر و خصوصیات ساختاری کاتالیزورها 65
4-1-1- مطالعه پراش اشعه X (XRD) 65
عنوان صفحه
4-1-2- مطالعه ی تکنیک SEM و تعیین مورفولوژی و اندازه ذرات.. 70
4-1-3- شناسایی کاتالیزور از طریق ترموگراویمتری (TGA / DSC / DTA ) 71
4-2- تست راکتوری کاتالیزورها 72
4-2-1- بررسی واکنش اکسایش بنزیل الکل در حضور کاتالیزورهای VPOو Co / VPO تهیه شده از روش I و II 73
4-2-1-1- بررسی اثر نوع الکل دراکسیداسیون الکل ها توسط کاتالیزور I) ) (3%) Co/VPO.. 74
4-2-1-2- بررسی اثر حلال دراکسیداسیون بنزیل الکل توسط کاتالیزورI) ) (3%) Co/VPO.. 75
4-2-1-3- بررسی اثر مقدار کاتالیزور I) ) Co/VPO (3%) در اکسیداسیون بنزیل الکل 76
4-2-1-4- بررسی اثر خیساندن و قابلیت کاربرد مجدد کاتالیزور I) ) (3%) Co/VPO.. 77
4-2-1-5- بررسی اثر تغییر نسبت اکسید کننده به ماده اولیه در واکنش اکسیداسیون بنزیل الکل توسط کاتالیزور I)) (3%) Co/VPO.. 79
4-2-1-6- بررسی اثر دما دراکسیداسیون بنزیل الکل توسط کاتالیزور I) ) (3%) Co/VPO.. 80
4-3- نتیجه گیری. 81
مراجع……………………………………………………………………………………………82
چکیده لاتین
فهرست شکل ها
عنوان صفحه
شکل 1-1- شمایی از مراحل انجام فرایند کاتالیزوری. 12
شکل 2-1- تاثیر نسبت P/V در محلول بر خصلت بلوری پیش کاتالیزوری (VO)2 H4 P2 O9 تهیه شده در محیط آلی 40
شکل 2-2- تصاویر میکروسکوپی الکترونی روبشی (SME) کاتالیزور VPO که مورفولوژی ورقه ای شکل را دارا می باشد 41
شکل 2-3- نمایی از شکل ذرات کاتالیزور VPO و نقش تغییر شکل ذرات بر روی خواص شیمیایی کاتالیزور 49
شکل2-4- (a )کاتاالیست فعال شده در محیط بوتان.(b ) در محیط پروپان. 51
شکل 3-1- کروماتوگرام محصول اکسیداسیون بنزیل الکل با کاتالیزورCo/VPO به مقدار 1/. گرم 59
شکل 4-1- طیف XRD ترکیب (VO)2P2O7 و VOHPO4-0.5H2O.. 65
شکل 4-2- طیف XRD ترکیب (1%) Co / VPO ( I ) 67
شکل 4-3- طیف XRDترکیب (3%) Co / VPO ( I ) 67
شکل 4-4- طیف XRD ترکیب (6%) Co / VPO ( I ) 68
شکل 4-5- طیف XRD ترکیب (1%) Co / VPO (II ) 68
شکل 4-6- طیف XRD ترکیب (3%) Co / VPO (II ) 69
عنوان صفحه
شکل 4-7- طیف XRD ترکیب (6%) Co / VPO (II ) 69
شکل 4-8-(a SEMنمونه کاتالیست VPO با بزرگنمایی (2000)SEM (b نمونه کاتالیست VPO با بزرگنمایی (500) 70
پایان نامه : سنتز گزینشپذیر برخی از مشتقهای دیهیدروپیرانو[C-۲,۳] کرومن و بیسکومارین از طریق واکنشهای...
3-5-3 بهینه سازی دما در سنتز دیهیدروپیرانو[C-۲،۳]کرومن.. 57
3-5-4 بهینه سازی حلال در سنتز دیهیدروپیرانو[C-۲،۳]کرومن.. 57
۳-6- روش کلی تهیه مشتقهای دیهیدروپیرانو[C-۲،۳]کرومن با بهره گرفتن از نانوذرات منیزیم اکسید. 58
۳-6-1 سازوکار واکنش تهیه دیهیدروپیرانو[C-۲،۳] کرومن.. 59
۳-7 بررسی و اثبات ساختار دیهیدروپیرانو[C-۲،۳] کرومن.. 61
۳-7-2 بررسی طیف رزونانس مغناطیس هستهی هیدروژن ترکیب(b۲) 62
فهرست شکل ها
عنوان صفحه
شکل(۱-۱) طرحی از واکنش های چندجزیی.. 4
شکل (۱-2) ویژگیهای یک سنتز ایدهآل. 4
شکل(۱-4) ساختار برخی از مشتقهای کومارین.. 8
این مطلب را هم بخوانید :
شکل(۱-5)مشتقهایی از کومارین با خاصیت فلوئورسانسی.. 9
شکل(۱-6) سنتز کومارین به روش پرکین.. 10
شکل)۱-7) ساختار حدواسطهای پرکین.. 10
شکل)۱-8) سنتز کومارین به روش پکمن.. 11
شکل(۱-9) تهیه بیسکومارین.. 12
شکل)10-۱)۱۱-اوودیونل ۱۲- لاپاکنول. 13
شکل(۱-11)مقایسه شدت فتوکرومیسم: (۱۳)H۳- نفتو[۲،۱-b] پیران، (۱۴) H2-نفتو[۲،۱-b] پیران. 13
شکل(12-۱) سنتز کرومن با کاتالیزگر فلزی.. 14
شکل(13-۱)فلاونون(۱۸) و3-متوکسیH2کرومن(۱۹) 15
شکل(14-۱) سنتز کرومن با بهره گرفتن از مشتقهای کومارین توسط فوکس… 16
شکل(۱-۱۵) سنتز کرومن با مشتقهای کومارین توسط پیزو. 17
شکل)۱-16)۴- هیدروکسی کومارین و برخی از مشتق های ۴-هیدروکسی کومارین.. 18
شکل(17-۱) مشتقهایی از دی هیدروپیرانو[C-۲،۳] کرومن.. 19
شکل(18-۱) تهیه دی هیدروپیرانو[C-۲،۳] کرومن توسط هروی.. 20
شکل (۲-1) تهیه مشتقهای بیسکومارین توسط نانو ذرات منیزیم اکسید. 36
شکل(۲-5) تهیه مشتقهای دی هیدروپیرانو[C-۲،۳] کرومن توسط نانو ذرات منیزیم اکسید. 40
شکل(۳-1) الگوی پراش پرتوی ایکس (XRD) نانوذرات منیزیم. 47
شکل (۳-2) تصویر میکروسکوپ الکترونی روبشی برای نانوذرات منیزیم اکسید. 48
شکل(۳-۳) روش کلی تهیه مشتقهای بیسکومارین با بهره گرفتن از نانوذرات منیزیم اکسید. 51
شکل(۳-4) سازوکارتهیه مشتقهای بیسکومارین.. 53
شکل (3-5) طیف زیر قرمز ترکیب(a1) 54
شکل (3-6) طیف رزونانس مغناطیس هستهی هیدروژن ترکیب (a۱) 55
شکل(۳-8) روش کلی تهیه مشتقهای دیهیدروپیرانو[C-۲،۳]کرومن با بهره گرفتن از نانوذرات منیزیم اکسید. 58
شکل (۳-9) سازوکار تهیه مشتقهای دیهیدروپیرانو[C-۲،۳] کرومن.. 60
شکل (3-10) طیف زیر قرمزترکیب(b2) 61
دانلود پایان نامه طراحی وضعیتی امن برای بکار گیری اینترنت اشیا در صنعت نفت و گاز دانلود متن کامل پای...
3-13-2کاربرد نانوتکنولوژی در اینترنت اشیا صنایع نفت و گاز. 76
4-13-2مزایای استفاده از اینترنت اشیا در صنایع نفت و گاز. 77
14-2نتیجه گیری. 77
فصل سوم: طراحی وضعیت امن برای بکار گیری اینترنت اشیا. 78
1-3مقدمه. 79
2-3 مدل پیشنهادی. 79
1-2-3پیش شرط ها. 81
1-1-2-3الزامات امنیتی. 81
2-1-2-3تعیین قلمرو و محدودیت های محیطی. 81
3-1-2-3تعیین اهداف راهبردها و سیاست های امنیتی. 81
4-1-2-3شناسایی اولویت های امنیتی. 82
5-1-2-3تعیین هزینه امنیتی. 82
2-2-3برنامه ریزی و ایجاد طرح. 82
1-2-2-3 بررسی برنامه ریزی استراتژیک. 82
2-2-2-3 بررسی برنامه ریزی فناوری اطلاعات. 83
3-2-2-3الزامات و ساختار های موجود. 83
4-2-2-3مطالعه زنجیره ارزش و تامین. 83
5-2-2-3طرح ریزی برای ساختار اینترنت اشیا و تعیین نقش اینترنت اشیا 83
3-2-3تفکیک سازی نقش ها و ساختار. 83
این مطلب را هم بخوانید :
4-2-3پیاده سازی و اجرا. 84
5-2-3مدیریت امنیت. 86
6-2-3 مکانیزم ها و روش های ارزیابی امنیت. 86
3-3نتیجه گیری. 86
فصل چهارم : تجزیه و تحلیل داده ها ،ارزیابی مدل پیشنهادی. 87
1- 4 مقدمه. 88
2-4مطالعه موردی. 88
1-2-4جمع بندی مطاله موردی. 100
3-4ارزیابی مقایسه ای. 100
1-3-4ابزار مورد استفاده. 101
2-3-4تعیین هدف و معیارها. 101
3-3-4تحلیل نتایج. 104
4-4ارزیابی به وسیله پرسش نامه. 105
1-4-4روش پژوهش و جمع آوری داده ها. 105
2-4-4روایی و پایایی پرسشنامه. 105
3-4-4روش آلفای کرونباخ. 106
4-4-4آنالیز و تجزیه و تحلیل داده ها. 108
5-4نتیجه گیری. 123
فصل پنجم: نتیجه گیری. 124
1-5 خلاصه تحقیق. 125
2-5محدودیت های تحقیق. 126
3-5 پیشنهاداتی برای تحقیقات آینده. 127
منابع و مآخذ. 128
پیوست. 134
فهرست شکلها
شکل1-2 تبدیل اینترنت دو بعدی به سه بعدی ]2 [………………………………………………………………………………..8
شکل2- 2 ابعاد اینترنت اشیا]8[…………………………………………………………………………………………………………..8
شکل3-2 تعداد فزاینده ای از اشیایی که تا سال 2020 به اینترنت متصل می شوند]11[……………………………..10
شکل4-2تخمین اشیا ( بخش های مختلف) متصل به اینترنت]12[…………………………………………………………10
شکل 5-2ارتباط اینترنت اشیا با سایر شبکه های موجود]15[…………………………………………………………………14
شکل6-2فن آوری های حیاتی دراینترنت اشیا ]21[……………………………………………………………………………..15
شکل7-2 دسته بندی فن آوری های حیاتی دراینترنت اشیا]22[…………………………………………………………….15
شکل8-2طرز خواندن اطلاعات توسط RFID. ]25[……………………………………………………………………………..22
شکل9-2 ساختار EPC. ]25[…………………………………………………………………………………………………………….23
شکل10-2 نمایش کد EPC. ]25[……………………………………………………………………………………………………..23
شکل 11-2واسط نرم افزاریSavant.]25 [………………………………………………………………………………………..24
شکل12-2سرویس دهندهONS. ]25[…………………………………………………………………………………………………25
شکل 13-2انواع آنتن های RFID……………………………………………………………………………………………………….27
شکل14-2 دسته بندی سیستم های RFIDاز نظر محدوده دسترسی…………………………………………………………28
شکل 15-2 کاربردهای RFID……………………………………………………………………………………………………………29
شکل16-2 یک واسط NFCمانند یک تلفن همراه اطلاعات یک کارت غیر فعال را می خواند……………………34
شکل17-2اطلاعات یک واسط NFCمانند یک تلفن همراه توسط یک واسط فعال همچون یک دستگاه فروش بلیت خوانده می شود………………………………………………………………………………………………………………………..35
شکل18-2NFCبه عنوان یک رابط دوطرفه بین دو تلفن همراه عمل می کند……………………………………………35
شکل19-2ساختار کلی شبکه حس/کار……………………………………………………………………………………………….38
شکل20-2ساختار خودکار…………………………………………………………………………………………………………………38
شکل21-2ساختار نیمه خودکار………………………………………………………………………………………………………….39
شکل22-2ساختمان داخلی گره حسگر/کارانداز……………………………………………………………………………………40
شکل23-2 پشته پروتکلی………………………………………………………………………………………………………………….42
شکل24-2 ذره میکا………………………………………………………………………………………………………………………….47
شکل25-2 ساختار داخلی غبار هوشمند……………………………………………………………………………………………..48
شکل26-2معماری سه لایه اینترنت اشیا]28[……………………………………………………………………………………….49
شکل 27-2نمایش معماری چهار لایه اینترنت اشیا]29[………………………………………………………………………..50
شکل 28-2معماری پنج لایه اینترنت اشیا]20[……………………………………………………………………………………..51
شکل 29-2نمای از معماری شش لایه ای اینترنت اشیا]30[………………………………………………………………….52
شکل30-2معماری سه لایه اینترنت اشیای زیرآب]34[………………………………………………………………………..55
شکل31-2 دغدغه ها و نیازمندی ها امنیت در اینترنت اشیا]43[…………………………………………………………….60
شکل32-2دسته بندی حملات برروی اینترنت اشیا]43[………………………………………………………………………..61
شکل33-2مدل 3c. ]44[…………………………………………………………………………………………………………………62
شکل 34-2مدل امنیتی 3c. ]44[………………………………………………………………………………………………………..62
شکل 35-2نمایشی ساده از ساختار کلی امنیت اینترنت اشیا]21[……………………………………………………………63
شکل36-2چارچوبی برای امنیت اینترنت اشیا. ]45[……………………………………………………………………………..66
شکل37-2معماری امنیت برمبنای معماری چهار لایه اینترنت اشیا. ]46[………………………………………………..67
شکل38-2طرح چاه هوشمند…………………………………………………………………………………………………………….70
شکل39-2اجزای چاه هوشمند…………………………………………………………………………………………………………..70
شکل40-2 نمایی از کاربرد RFIDدر انبارداری…………………………………………………………………………………….74
شکل 41-2 نمایی از کاربرد RFID در حوزه ایمنی کارکنان……………………………………………………………………75
شکل1-3 مدل پیشنهادی……………………………………………………………………………………………………………………80
شکل1-4 منطقه ی نفتی مورد نظر………………………………………………………………………………………………………89
شکل2-4 زنجیره ارزش منطقه نفتی……………………………………………………………………………………………………89
شکل3-4 مدل استقرار اینترنت اشیا در مطالعه موردی…………………………………………………………………………..95
شکل4-4 شمای کلی روش AHP………………………………………………………………………………………………….. 101
شکل 5-4 نتایج مقایسه از منظرامنیت فنی و سیستمی…………………………………………………………………………102
شکل 6-4 نتایج مقایسه از منظر امنیت داده ها و اطلاعات…………………………………………………………………..102
شکل 7-4 نتایج مقایسه از منظر امنیت فیزیکی و محیطی…………………………………………………………………….103
شکل 8-4 نتایج مقایسه از منظر کارایی فرایندی در صنعت نفت و گاز………………………………………………..103
شکل 9-4 نتایج مقایسه از منظر کارایی سرویس ها و سیستم های موجود در صنعت نفت و گاز……………..103
شکل 10-4 نتایج مقایسه از منظر کارایی محیطی………………………………………………………………………………..104
شکل 11-4 نتایج مقایسه تمام گزینه ها…………………………………………………………………………………………….104
فهرست نمودارها
نمودار 1-4 دسته بندی خبرگان از لحاظ جنسیت………………………………………………………………………………..108
نمودار 2-4 دسته بندی خبرگان از منظر مرتبه علمی……………………………………………………………………………108
نمودار 3-4 دسته بندی خبرگان بر اساس رشته تحصیلی………………………………………………………………………109
نمودار 4-4 مقایسه نتایج ارزیابی کلی مدل پیشنهادی…………………………………………………………………………..110
نمودار 5-4 ارزیابی میزان مناسب بودن کلی مدل توسط خبرگان…………………………………………………………..111
نمودار 6-4 ارزیابی درستی طراحی بخش های مختلف توسط خبرگان………………………………………………….111
نمودار 7-4 ارزیابی میزان صحت ارتباط بین بخش ها توسط خبرگان……………………………………………………111
نمودار 8-4 ارزیابی میزان مناسب بودن روش های بکار گرفته شده در مدل توسط خبرگان……………………….112
نمودار 9-4 ارزیابی درست و منطقی بودن کلی مدل توسط خبرگان………………………………………………………112
نمودار10-4 ضریب آلفای کروباخ هر یک بخش ها در چارچوب پیشنهادی………………………………………….113
نمودار 11-4 درصد فراوانی آمار خبرگان پیرامون مناسب یا نامناسب بودن بخش ها در مدل پیشنهادی………114
نمودار 12-4 ضریب آلفای کرونباخ مشخصه های بخش پیش شرط ها………………………………………………….120
نمودار 13-4 ضریب آلفای کرونباخ مشخصه های بخش برنامه ریزی و ایجاد طرح…………………………………121
دانلود پایان نامه کلون و بیان فاکتور نکروز دهنده تومور آلفا (TNF-α) دانلود متن کامل پایان نامه مقطع کارش...
| فهرست جداول عنوان |
| جدول 1-1 : برخی از پروتئینهای نوترکیب موجود در بازار دارویی………………………..3 |
| جدول 2-1 : معایب و مزایای سیستمهای بیان کننده مختلف جهت تولید پروتئینهای نوترکیب…….12 |
| جدول 3-1 : تعدادی از پروموترهای مورد استفاده برای بیان ژن در E. coli…………..17 |
| جدول 1-2 :ترکیبات مورد نیاز در سنتز cDNA…………………………………………………40 |
| جدول 2-2 : ترکیب واکنش PCR(مقادیر بر حسب میکرولیتر)……………………………..42 |
| جدول 3-2 : واکنش برش آنزیمی………………………………………………………………………46 |
| جدول 4-2 : ترکیبات واکنش اتصال TNF-αو pBR322………………………………..47 |
| جدول 5-2 : فهرست سویه‌های E. coli استفاده شده در این تحقیق……………………..47 |
| جدول 6-2 : ترکیبات محیط کشت LB……………………………………………………………..48 |
| جدول 7-2 : مخلوط واکنش برای برش آنزیمی……………………………………………………54 |
| جدول 8-2 : اجزای واکنش اتصال……………………………………………………………………..54 |
| جدول 9-2 : تهیه 12 میلیلیتر محلول ژل پایین با غلظت 10 در صد………………………57 |
| جدول 10-2 : تهیه 5 میلی لیتر محلول ژل بالا با غلظت 4 در صد………………………….57 |
| جدول 11-2 : ترکیبات بافر نمونه (5x)……………………………………………………………..57
|
| جدول 12-2 : ترکیبات بافر الکترود (بافر مخازن)…………………………………………………57 |
| فهرست اشکال | |
| شکل 1-1 : اجزاء اولیه و اصلی وکتور بیانکننده ژن در E. coli………………………………..16 | |
| شکل 2-1: نقشه کروموزوم MHC انسان و ژن hTNFα…………………………………………27 | این مطلب را هم بخوانید : منبع پایان نامه درمورد حقوق شهروندی، آیین دادرسی، دادرسی کیفری |
| شکل 3-1 : ساختار کریستالی TNFα بر گرفته از Protein Data Bank………………..29 | |
| شکل 4-1 : شکل 4-1 مسیر سیگنالی TNFR1………………………………………………………33 | |
| شکل 1-2 : نقشه فیزیکی پلاسمید pBR322 (اقتباس از فرمنتاس)…………………………..46 | |
| شکل2-2 : نقشه فیزیکی پلاسمید pET21a (+) (اقتباس از فرمنتاس)………………………53 | |
| شکل 1-3 : چهار نمونه خون انسان سالم………………………………………………………………..62 | |
| شکل 2-3 : الکتروفورز RNA کل استخراج شده از 4 نمونه خون با بهره گرفتن از کیت……63 | |
| شکل 3-3 : الکتروفورز محصول تکثیر شده cDNA فاکتور نکروز دهنده تومور آلفای نوترکیب با روش PCR و با پرایمرهای R و F بر روی ژل آگارز………………………………..64 | |
| شکل 4-3 : نقشه پلاسمید نوترکیبpBR322tnf ………………………………………………….65 | |
| شکل 5-3 : الگوی برش نخورده پلاسمیدهای نوترکیب pBRtnf در مقایسه با pBR322 فاقد cDNA فاکتور نکروز دهنده تومور آلفا……………………………………………………………66 | |
| شکل 6-3 : الکتروفورز محصول واکنش PCR بر روی پلاسمیدهای نوترکیب بر روی ژل آگارز………67 | |
| شکل 7-3 : نقشه پلاسمید نوترکیب pET21tnf…………………………………………………….68 | |
| شکل8-3 : نتایج الکتروفورز محصول PCRپلاسمید نوترکیب pETtnf با پرایمرهای R و F بر روی ژل آگارز…………………………………………………………………………………………………………………………………69 | |
| شکل 9-3 : الکتروفورز محصول پلاسمید نوترکیب pET21tnf برش یافته با آنزیم های NdeI، HindIII و بریده شده با دو آنزیم NdeI– HindIIIبر روی ژل آگارز…………..70 | |
| شکل 10-3 : توالی نوکلئوتیدی ژن TNF و اسیدآمینهای ترجمه شده آن از یکی از کلون های نوترکیب به دست آمده، pET21tnf………………………………………………………71 | |
| شکل 11-3 : بیان ژن TNF-α انسانی در BL21 E. coli………………………………………72 | |
| شکل 12-3 : مقایسه غلظتهای مختلف IPTG بر روی بیان……………………………………73 | |
| شکل 13-3 : مقایسه بیان پروتئین در زمانهای مختلف بعد از القاء…………………………….73 | |
| شکل 14-3 : نتایج وسترن بلاتینگ بیان پروتئین نوترکیب در غلظتهای 0625/0، 125/0، 5/0و 1 میلیمولار..74 |
علایم اختصاری:
LB: Luria Bertani
NK cell: Natural killer cell
OD: Optical Density
TNF: Tumor Necrosis Factors
TAE: Tris-acetate EDTA
SDS-PAGE: Sodium dodecyl sulfate polyacrylamid gel electrophoresis
RT-PCR: Reverse transcription polymerase chain reaction
rhTNF-α: Recombinant human Tumor Necrosis Factor alpha
MCS: Multiple cloning site
LPS: Lipopolysaccharide
IPTG: Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside
IL: Interleukin
INF: Interferon
EDTA: Ethylene diamine tetra acetic acid
DW: Distilled water
APS: Ammonium persulfate
MS: Multiple Sclerosis
TEMED: N,N,N’,N’-Tetramethylethylenediamine or N,N,N’,N’-Tetramethyl-1,2-diaminoethan
TE: Tris EDTA
TM: Melting temperature
RCLB: Red Cell Lysis Buffer
پایان نامه : کلونینگ و بیان بخش‌های آنتی ژنیک سیتوتوکسین مرتبط با ژن A (CagA) هلیکو باکتر پیلوری ...
3-10 توالی یابی.. 56
3-11 انتقال پلاسمید pET-32a (+) حاوی ژن هدف به باکتری BL21 (DE3). 56
3-12 تحریک بیان ژن هدف… 56
3-13 استخراج پروتئین از باکتری.. 57
3-14 الکتروفورز پروتئینها به روش SDS-PAGE. 58
3-14-1 مراحل بستن ژل به صورت زیر انجام شد: 59
3-15 دات بلات… 61
3-16 محلولها و بافرها 62
3-16-1 بافر شستشو یا محلول TBS. 62
3-16-2 محلول بلوکه کننده 62
3-16-3 بافر شستشو یا محلول TBS-T.. 62
3-16-4 آنتیبادی اولیه. 62
3-16-5 آنتیبادی ثانویه. 62
3-16-6 روش تهیه محلول رنگ آمیزی DAB.. 62
3-17 خالص سازی پروتئین.. 64
3-18 آماده سازی آنتی ژن ایمنی زا برای تزریق به مرغ. 64
3-19 ایمنی زائی مرغ‌ها جهت تولید آنتی بادی اختصاصی.. 65
3-19-1 تزریق اولیه: 65
این مطلب را هم بخوانید :
3-19-2 تزریق‌های ثانویه (Booster injection). 66
3-20 جمع آوری و ذخیره تخم مرغ. 66
3-21 جداسازی IgY با بهره گرفتن از روش پلی اتیلن گلایکول 14700.. 66
3-22 بررسی IgY به روش الکتروفورز SDS-PAGE و دات بلات… 67
4 نتایج و بحث… 67
4-1 تعیین نواحی آنتی ژنیک ژن CagA.. 67
4-2 تایید آلودگی نمونه‌های بیوپسی.. 69
4-3 تعیین کمیت و کیفیت DNA.. 69
4-4 بررسی محصولات PCR.. 70
4-5 خالص سازی محصول PCR.. 71
4-6 هضم PET32a (+) و ژن CagA.. 71
4-7 کلونینگ ژن CagA در باکتری DH5α.. 72
4-8 تأیید صحت قطعه کلونشده در pET32a (+). 73
4-9 نتایج کلونی PCR.. 73
4-10 تایید نتایج کلونی PCR با بهره گرفتن از T7. 74
4-11 استخراج پلاسمید و انجام هضم آنزیمی.. 75
4-12 توالی یابی.. 76
4-13 آنالیز فیلوژنتیکی توالی آمینواسیدی CagA.. 76
4-14 بیان ژن. 78
4-15 SDS-PAGE. 78
4-16 دات بلات… 79
4-18 تولید IgY ضد هلیکو باکتر پیلوری-CagA در زرده تخم مرغ. 81
5 نتیجه گیری و پیشنهادات… 85
فهرست شکلها
| عنوان صفحه |
شکل 4-1. نتایج نرم افزار bcepred. 68
شکل 4-2. تست اوره آز انجام شده بر روی نمونه‌های بیوپسی. 69
شکل 4-3. تعیین کیفیت و کمیت DNA. 70
شکل4-5. خالص سازی محصول PCR . 71
شکل4-6. هضم ناقل بیان و قطعه هدف… 72
شکل4-7. کشت خطی از تک کلون‌های رشد کرده بر روی محیط کشت LB-آگار حاوی آمپی سیلین.. 73
شکل 4-8. کلونی PCR. 74
شکل4-9. کلونی PCR با بهره گرفتن از پرایمر T7 و T-terminatoor. 75
شکل 4-10. استخراج پلاسمید نوترکیب و هضم آنزیمی.. 76
شکل 4-12. بررسی بیان پروتئین نوترکیب با الکتروفورزSDS-PAGE 78
شکل 4-13. دات بلات پروتئینهای استخراج شده. 79
شکل 4-14.تعیین غلظت پروتئین با بهره گرفتن از روش برادفورد. 81
شکل 4-15.خالص سازی پروتئین و حذف باند‌های غیر اختصاصی. 81
شکل 4-16. الکتروفورز SDS-PAGE به منظور بررسی پروتئین زنجیره سبک و سنگین IgY استخراج شده از زرده تخم مرغ 82
فهرست جدول‌ها
| عنوان صفحه |
جدول 3-1 مواد و مقادیر لازم برای انجام PCR یک واکنش…. 43
جدول3-2. برنامه حرارتی مورد استفاده جهت تکثیر نواحی آنتی ژنیک ژن CagA.. 44
جدول3-3 مواد مورد نیاز جهت تهیه محیط کشت LB مایع.. 46
جدول3-4 مواد مورد نیاز جهت تهیه محیط کشت جامد LB-Agar. 47
جدول 3-5 مواد و مقادیر لازم برای انجام واکنش هضم قطعه هدف ژنCagA.. 48
جدول 3-6. مواد و مقادیر لازم برای انجام واکنش هضم pET-32a (+) 49
جدول3-7. مواد مورد نیاز جهت انجام واکنش الحاق.. 50
جدول 3-8. مواد و مقادیر لازم برای انجام واکنش هضم پلاسمید pET32a (+)-CagA.. 55
جدول3-9. مواد مورد نیاز برای تهیه بافر Laemmli buffer samples 5X. 58
جدول3-10 مواد و مقادیر لازم جهت تهیه ژل پایینی SDS-PAGE. 58
جدول 3-11 مواد لازم جهت بستن ژل بالایی SDS-PAGE. 59
جدول3-12. مواد و مقادیر مورد نیاز برای بافر 5X تانک SDS-PAGE. 59
فهرست علائم و اختصارات